Explore our solutions
革新的なPin-point塩基編集プラットフォームを活用した細胞株エンジニアリングサービス
Revvityの独自のPin-pointテクノロジーと非臨床サービスを組み合わせ、高度な細胞エンジニアリング研究を加速させましょう。
- 二本鎖DNA切断を回避しつつ、正確な遺伝子編集を導入する独自の塩基編集アプローチを活用できます。
- 選択した細胞モデルで、機能が重複する遺伝子や、複数の遺伝子間の相互作用を探索できます。
- 複数遺伝子ターゲットの同時編集による低リスクなマルチプレックス遺伝子ノックアウトプロジェクトを迅速に進めることができます。
- 細胞毒性、オフターゲット編集、および不要なゲノム再編を最小限に抑えます。
- 単一介入、マルチプレックスノックアウト、および同時ノックアウトとノックインを可能にするPin-pointプラットフォームの独自の能力を活用し、高度に複雑な細胞モデルを生成できます。
- 熟練した社内チームが提供する信頼性の高い再現性のあるデータを受け取ることができます。
細胞エンジニアリングプロジェクトで他に類を見ない精度と柔軟性を実現するRevvityと連携しませんか？
高速マルチプレックス編集ワークフローを探索する
Pin-pointによる複数遺伝子ノックアウトプロジェクトのワークフロー例
- 高活性のコントロール単一ガイドRNA（sgRNA）を用いて、試薬の導入条件を最適化します。
- 対象遺伝子を標的とするPin-point sgRNAを設計し、アレイ化フォーマットでテストして最も効率的な遺伝子ノックアウトをもたらすgRNAを特定します。
- 選択されたsgRNAは、より大規模なトランスフェクションで個別に検証し、効率を確認します。
- 検証済みのsgRNAを組み合わせてマルチプレックストランスフェクションを行い、複数のノックアウト編集を含む遺伝子編集プールを作製します。
- 編集済みプールからクローナル細胞集団を単離し、DNA配列解析を実施して、単一および複数編集されたクローンを同定します。
- 望ましい遺伝子型を持つクローンを増殖させ、編集を確認した後に凍結保存を行います。
多重遺伝子編集データの例をご覧ください
C>T塩基変換とタンパク質喪失スクリーニングによる、遺伝子ノックアウトに有効なPin-point sgRNAの同定
(A) 最適化された3つの条件下でPin-point nCas9とRat APOBEC mRNAを用いてHCT-116細胞に10個のsgRNA/ターゲットをトランスフェクションした結果、遺伝子AおよびBノックアウトに活性を示すGRN973およびGRN998がDNAシーケンスにより確認された。(B)これはさらにFACS解析により検証された。(C) GRN973およびGRN998と、第三の遺伝子を標的とする検証済みgRNA（GRN762）との多重トランスフェクションでは、単一、二重、または三重標的プールのいずれにおいても生存率の低下は見られなかった。(D)DNAシーケンス解析により、3つの遺伝子すべてにわたって有効なC>T変換が確認された。(E)FACS解析は、トランスフェクションされた細胞の7%が3つの標的遺伝子すべての発現を失ったことを示している。
サービスに含まれる内容
- 希望する細胞株での編集効率を最大化するためのPin-point試薬導入条件の最適化
- 対象とする遺伝子のC>Tへの高効率編集を可能にする効果的なPin-pointガイドRNAの設計およびスクリーニング
- 高活性ガイドRNAの同時導入による複数の遺伝子標的の同時編集の可能性
- クローン細胞集団の分離および遺伝子型解析を行い、1回のスクリーニングで単一または複数編集されたクローンの特定を実現
- 凍結保存されたクローン細胞株および関連するデータの提供
- プロジェクト進行状況に関するプロジェクト管理チームからの定期的なアップデート
追加サービス
- 機能検証・確認サービスについては、当社のサイエンティフィックチームまでご相談ください。また、コントロールクローンやプールなど、プロジェクトに追加できる成果物についてもご検討いただけます。
